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實驗樣品:本次實驗樣品為水稻葉片,為滿足樣品實驗需求更好的提取樣品RNA,此次實驗選用上海凈信的多樣品組織研磨儀來對其樣品組織進(jìn)行前處理實驗研磨操作,以便后續(xù)對樣品RNA的提取。
實驗設(shè)備:多樣品組織研磨儀Tissuelyser-192L
水稻葉樣品前處理的實驗研磨操作步驟:
1.在實驗開始前,需要提前準(zhǔn)備好實驗設(shè)備多樣品組織研磨儀一臺,96深孔板2塊,5mm研磨珠以及水稻葉片樣品若干
2.需先對深孔板本以及適配器放入液氮終進(jìn)行冷凍預(yù)冷處理;對其葉片樣品進(jìn)行剪切,將其樣品剪切成小塊狀,以便更方便的將其樣品放置在深孔板內(nèi)
3.把剪切后的組織樣品裝入預(yù)冷處理后的深孔板內(nèi),再把預(yù)冷處理后的深孔板放入儀器設(shè)備內(nèi),旋緊螺帽
4.啟動儀器,根據(jù)樣品的實驗需求對其設(shè)備的程序參數(shù)進(jìn)行調(diào)節(jié)設(shè)置
5.啟動儀器的運行鍵,開啟儀器的程序運行,開始對組織樣品的前處理實驗研磨。
6.待儀器停止運轉(zhuǎn)后,研磨結(jié)束,關(guān)閉電源,即可將深孔板從研磨倉內(nèi)取出,然后使用開蓋工具打開深孔板的蓋子,取出實驗樣品即可。
實驗操作注意事項:
1、按照樣品量來選擇研磨珠配比和參數(shù)設(shè)置,能夠滿足對樣品的前處理實驗效果,有不清楚的及時問上海凈信銷售人員。
2、往適配器里放研磨管時注意平面配平,保證適配器壓蓋在水平線。
實驗對比圖:水稻葉片樣本前處理實驗研磨前后效果圖
本次實驗通過使用多樣品組織研磨儀對水稻葉片樣品的前處理實驗研磨,成功提取了樣品RNA。在實驗操作過程中,我們深刻體會到了研磨儀設(shè)備在植物組織研磨和RNA提取方面的性能優(yōu)勢。裂解珠碰撞法不僅能夠在短時間內(nèi)快速高效地破碎植物細(xì)胞壁,還避免了傳統(tǒng)方法中的費時費力、效果差以及交叉污染等問題。
通過本次實驗,我們驗證了該研磨儀在處理植物樣本、尤其是水稻葉片方面的有效性,并成功獲得了高質(zhì)量的RNA樣本。這為后續(xù)的分子生物學(xué)實驗提供了有力的支持。同時,我們也意識到在實驗中合理設(shè)置研磨珠配比和參數(shù)的重要性,以及實驗操作中的注意事項,這將有助于我們更好地進(jìn)行類似實驗,提高實驗結(jié)果的準(zhǔn)確性和可靠性。